dermed łódź dermatolog ad 6

Wykluczenie pirydoksyny z pożywki i fosforanu pirydoksalu z testu dało aktywność zmutowanego enzymu, która była około 50 procent niższa niż aktywność enzymu typu dzikiego. Dodanie fosforanu pirydoksalu do testu lub włączenie pirydoksyny (0,1%) do pożywki zwiększyło aktywność obu enzymów w podobnym stopniu. Włączenie zarówno pirydoksyny do ośrodka, jak i fosforanu pirydoksalu (0,4 mM) w teście zwiększyło względną aktywność enzymatyczną powyżej poziomów możliwych do uzyskania przez dodanie fosforanu pirydoksalu do samego testu. Jednak we wszystkich tych warunkach aktywność zmutowanego enzymu wynosiła konsekwentnie 50 do 60 procent aktywności enzymu typu dzikiego. Aktywność zmutowanego enzymu eksprymowanego w komórkach suplementowanych pirydoksyną była zbliżona do aktywności enzymu typu dzikiego wyrażanego w nieobecności pirydoksyny. W innych eksperymentach fosforan pirydoksalu, w stężeniach w zakresie od 0 do 30 mikro M, zwiększał względne aktywności normalnych i zmutowanych enzymów w tym samym stopniu, wskazując, że mają one takie samo powinowactwo wiązania dla kofaktora (dane nie przedstawione). Przy stężeniach fosforanu pirydoksalu do 2,0 mM nie było dalszej poprawy aktywności żadnego z enzymów.
Dyskusja
Odkrycie, które dotyczyło członków i obligatoryjnych nosicieli rodziny z związaną z X zależną od pirydoksyny anemią sideroblastyczną dziedziczyło ten sam allel ALAS2, potwierdza hipotezę, że defekt w tym genie leży u podstaw zaburzenia. Później zidentyfikowana mutacja cytozyny do guaniny w eksonie 8 genu ALAS2 w probandzie i dwóch innych członach pokrewnych prowadzi do konserwatywnego substytucji aminokwasowej seryny dla treoniny w pozycji 388 białka i skutkuje enzymem o obniżonej aktywności katalitycznej. czynność. Ta treonina jest niezmienna i znajduje się w regionie wysoce konserwatywnym w bakteryjnych i eukariotycznych białkach syntazy 5-aminolewulinowej, jak również w zależnej od fosforanu oksydazy fosforanowej 2-amino-3-ketomaślanu koenzymu A ligazy19 (Figura 2B). Miejsce wiążące pirydoksalne fosforany w ALAS2 u myszy 18 i ligaza 2 koenzymu 2-amino-3-ketomaślanu A jest niezmienną lizyną znajdującą trzy reszty od tej treoniny. Nasze badanie wykazało, że zastąpienie treoniny przez serynę nie obniżyło powinowactwa enzymu do jego kofaktora. Zmniejszona aktywność enzymatyczna zmutowanego białka może być spowodowana zmianą konformacyjną w pobliżu aktywnej lizyny, która zmniejsza powinowactwo enzymu do jego substratów, glicyny i sukcynylo-koenzymu A21.
Dlaczego leczenie pirydoksyną zwiększyło aktywność 5-aminolewulinowego kwasu probandowego do normalnych lub ponadprzeciętnych wartości nie jest jasne. Pirydoksyna (lub fosforan pirydoksalu) może wpływać na ilość katalitycznie aktywnego ALAS2 w mitochondriach, zwiększając syntezę, stabilność, transport do mitochondriów lub prawidłowe fałdowanie enzymu. Badania ekspresji wykazały, że włączenie pirydoksyny do pożywki wzrostowej zawsze zwiększało aktywność obu enzymów zmutowanych i typu dzikiego do poziomów wyższych niż osiągalne, gdy do testu dodano fosforan pirydoksalu, co sugeruje, że pirydoksynę (za pomocą fosforanu pirydoksalu) ułatwia prawidłowe fałdowanie białka, a tym samym tworzenie większych ilości katalitycznie aktywnego enzymu.
Dalszą niejednorodność mutacji w genie ALAS2 można przewidzieć w grupach z niedokrwistością syderotyczną związaną z chromosomem X, oprócz tych opisanych tutaj i przez Cottera i wsp.8
[patrz też: zdjęcie zęba, olejek imbirowy, kokcydioza leczenie ]

Dodaj komentarz

Twój adres email nie zostanie opublikowany. Pola, których wypełnienie jest wymagane, są oznaczone symbolem *

Powiązane tematy z artykułem: kokcydioza leczenie olejek imbirowy zdjęcie zęba