Autoimmunologiczny zespół polendokrynologiczny typu 1 i NALP5, autoantygen przytarczyc ad 5

Te autoprzeciwciała były wysoce swoiste dla niedoczynności przytarczyc związanych z APS-1, ponieważ nie wykryto reaktywności u pacjentów z APS-1, ale bez niedoczynności przytarczyc, u pacjentów z izolowaną niedoczynnością przytarczyc, u pacjentów z innymi autoimmunologicznymi endokrynopatiami lub u zdrowych osób z grupy kontrolnej (Tabela i Figura 1A). Aby potwierdzić swoistość autoprzeciwciał specyficznych wobec NALP5 w próbkach surowicy od pacjentów, przeprowadzono sekwencyjne immunoprecypitację z ludzkim NALP5 znakowanym 35S. Wykorzystano próbki surowicy od pacjentów z autoprzeciwciałami APS-1 i NALP5, które wykryto w teście radioimmunologicznym i immunobarwieniu tkanki przytarczycznej (patrz poniżej), próbki od pacjentów bez autoprzeciwciał NALP5 i próbki od zdrowych osób kontrolnych. Drugą immunoprecypitację przeprowadzono za pomocą króliczej surowicy odpornościowej przeciwko NALP5. Znakowane izotopem 35S rekombinowane białko NALP5 było zubożone tylko w próbki surowicy od pacjentów z APS-1 i niedoczynnością przytarczyc, wykazując swoistość autoprzeciwciał pacjentów wobec NALP5 (Figura 1B, ścieżki 3 do 5 w porównaniu z ścieżkami 6 do 8).
Dystrybucja mRNA NALP5 w tkankach
Rycina 2. Rycina 2. Analiza ekspresji RNA (mRNA) NALP5 i jego homologii. Panel A pokazuje ekspresję mRNA NALP5 w dojrzałych ludzkich tkankach, jak zmierzono za pomocą ilościowego testu PCR. Zwróć uwagę na nieciągłą oś y i jej zmienne interwały. T bary są odchyleniami standardowymi. Panel B pokazuje drzewo filogenetyczne (zaprojektowane z oprogramowaniem ClustalW) po lewej stronie, wskazujące homologie między mRNA w rodzinie białek NALP i ekspresję mRNA w ludzkim panelu z wieloma tkankami po prawej stronie. Każde z wybranych białek z rodziny białek NALP wykryto za pomocą 38-cyklowego, konwencjonalnego testu PCR z udziałem komplementarnego DNA (cDNA) z panelu tkankowego. Zwróć uwagę na prążek odpowiadający NALP5 dla próbki gruczołu przytarczycznego. Eksperymenty te przeprowadzono w celu wykluczenia ekspresji homologów NALP5 w przytarczycach. Próbki cDNA z kory nadnerczy nie były jeszcze dostępne po wykonaniu tych eksperymentów. GAPDH oznacza dehydrogenazę gliceraldehydo-3-fosforanową.
Zbadaliśmy również ekspresję NALP5 w różnych narządach przy użyciu ilościowych metod PCR. MRNA NALP5 był głównie eksprymowany w tkance przytarczyc (Figura 2A). Ponadto transkrypty NALP5 były również, choć w mniejszym stopniu, wykrywane w jajnikach i kilku dodatkowych typach tkanek, w których wykryto również innych członków rodziny białek NALP o wysokiej homologii z NALP5 (Figura 2B i Tabela w Dodatek dodatkowy).
Przytarczyc immunobarwienia
Rycina 3. Rycina 3. Immunowa barwienie na skrawkach gruczołów przytarczyc ludzkich i bydła. Wyniki analizy immunohistochemicznej wycinków z ludzkiej gruczołu przytarczycznego przedstawiono w panelach od A do D; immunofluorescencja kriosekcji gruczołowej przytarczycy jest pokazana w panelach od E do J. Tło wybarwienia jest pokazane w panelach A i E, przez pominięcie pierwotnych próbek surowicy. Przedstawiono również wzorce barwienia z próbkami surowicy: próbki od pacjenta z autoimmunologicznym zespołem polendokrynnym typu (APS-1) i niedoczynnością przytarczyc (panele B i F), próbki od pacjenta z APS-1 bez niedoczynności przytarczyc (panele C i G), próbki ze zdrowej grupy kontrolnej (Panel H) i próbki surowicy odpornościowej surowicy króliczej anty-NACHT-bogata w białka powtórzeń 5 (NALP5) (panele D, I i J)
[hasła pokrewne: olejek imbirowy, stomatologia ursynów, na zdrowie po włosku ]

Powiązane tematy z artykułem: na zdrowie po włosku olejek imbirowy stomatologia ursynów